1. 单光子激光器: 激发波长(nm):405、458、476、488、496、514、561、白激光(WLL):470-670连续激光器。
2. STED激光: 激发波长(nm):592、660、775。
3. 检测通道数:该仪器配备有5个荧光通道(3个PMT,2个HyD高灵敏度检测器),1个透射通道。
4.倒置明场荧光显微镜:以金属卤素灯为光源,带有微分干涉DIC功能,配套有不同倍率的APO油镜(APO 100×/1.4、APO 63×/1.4、APO 40×/1.32、APO 25×/0.75,APO 16×0.5)、干镜(APO 10×/0.4,APO 20×/0.7)和水镜(APO 25×/0.95)。
5. 在xy平面上分辨率可达50nm,在z轴方向上分辨率可达130nm。
6. 最高扫描分辨率8096×8096。
7. 扫描频率:7幅/秒。
8. 二氧化碳温控微型装置。
TCS-SP8 STED 3X 是单光子Confocal、荧光寿命成像(FLIM)和荧光相关(互相关)光谱(FCS/FCCS)单分子检测及受激损减STED超高分辨显微镜的集成系统,为目前国内同类产品最高端配置,于2016年初安装。可在2D或3D水平进行高分辨、高灵敏度、实时、活细胞或固定细胞和组织内多重荧光标记的定位(共定位),定量和定性检测,并可同时实现分子或单分子功能的检测。
单光子Confocal常规检测项目:
1. 采集单荧光标记和多重荧光标记样品的二维荧光图像(xy或xz)和透射光的DIC图像.
2. 采集三维荧光图像(xyz或xzy),可清晰显示样品内的微细结构和各种被标记分子荧光信号的相对位置,从而给出精细三维定位或共定位分布的荧光图像.
3. 采用动态跟踪或静态方法检测活细胞的生理变化及损伤情况,如:细胞融合,细胞凋亡等.
4. 实时跟踪荧光信号随着时间的变化(xt,xyt,xyzt),检测细胞内Ca2+、H+、自由基、线粒体膜电位的动态变化.
5. 检测药物进入细胞内的动态过程及分布.
6. 检测样品荧光光谱(xy-λ),可对光谱重叠的多重荧光信号进行光谱拆分.
7. 可进行光活化的检测.
8. 荧光漂白恢复FRAP检测:蛋白分子的运动、转位;细胞间通讯、膜流动性等.
9. 荧光能量共振转移(FRET)的检测。如检测:两种蛋白质之间的相互作用、蛋白质分子构型的改变等
10. 大视野拼图成像(二维或三维成像),如:全脑组织切片拼图成像。
11. 囊泡、细胞等实时轨迹追踪及轨迹分析
12. 可进行反射光成像:适合观察细胞囊泡、纳米颗粒、生物材料等。
13. 激发光谱和发射光谱的扫描
14. 光谱拆分
特色检测项目:
一、STED超高分辨成像
1. 单色荧光标记固定细胞或活细胞STED超高分辨成像(592、660、775nm)
2. 双色荧光标记固定细胞或活细胞STED超高分辨成像(592/660、592/775、660/775nm)
3. 三色荧光标记固定细胞或活细胞STED超高分辨成像(592/660/775nm)
二、荧光寿命成像FLIM、FLIM FRET检测
1)溶液中荧光分子的荧光寿命
2)活细胞或固定细胞中荧光分子的荧光寿命
3)FLIM FRET检测活细胞或固定细胞中两个分子之间相互作用,
如:蛋白质与蛋白质、受体与配体、
蛋白质与DNA、蛋白质与RNA
三、实时单分子运动、相互作用、分子密度等
1. 荧光相关光谱FCS检测
2. 荧光互相关光谱FCCS检测
具体检查项目:
1)溶液中荧光分子浓度,检查精度达PuM
2)活细胞膜单分子水平分子密度
3)活细胞内运动特性,如:受体内化等